首页>检验专业考试>复习指导>正文
2011年医学检验资格考试:免疫分析中干扰物的排除

www.zige365.com 2011-5-4 14:08:11 点击:发送给好友 和学友门交流一下 收藏到我的会员中心

近十几年,国内外报道了免疫分析中的假阳性、假阴性或其他的特异性干扰,尤其对双抗体夹心法测定干扰明显。干扰物有:血浆、血清蛋白(类风湿性因子、结合蛋白)、嗜异性抗体(Id)、人抗动物抗体(HAAA)和药物及其导致的代谢物等,尤其是后两种抗体干扰最多。

随着鼠源性单克隆抗体(鼠McAb)应用于免疫显像及免疫治疗,使患者产生人抗鼠抗体(HAMA)。而人在与宠物的接触中也易产生HAAA.注射疫苗及患腹腔疾病时,食物抗原也会产生HAAA.HAAA和HAMA的存在使免疫分析容易产生假阴阳性。一旦假阳性或假阴性的结果没有被发现,患者将要承受不必要的治疗及身体和精神上的痛苦。因而,鉴定和排除这些干扰物成为当务之急。

1、嗜异性抗体的干扰

嗜异性抗体(Id)是由低纯度抗原引起的,又称之为对非特异性抗原产生的抗体应答。1980年发现了Id对AFP的干扰。它是一类结合力弱的抗体,分为天然抗体和自身免疫抗体。前者又分为天然多特异性抗体、独特型抗体和类风湿性因子(RF)。天然Id是干扰物的主要来源。

天然抗体结合力弱,具有多特异性,普遍存在于人体中,医学教育`网搜集整理多为IgG.它识别多种化学结构和自身抗原。推测它是由体细胞突变导致抗体高变区的多样化而产生的。一旦抗原侵入免疫系统,则诱导体细胞突变,产生各种非特异性的抗体。随着抗原促进细胞分化,体细胞突变以高频率进行,产生高特异性的抗体。像RF一类的抗体比天然抗体更多的体细胞突变。天然抗体中的独特型抗体能和抗原结合又能和抗体结合的高变区,因此,它能和一些多特异抗体结合。当血清含有它们时,其结合大大增加,并出现Fab-Fab二聚体状态。

2、人抗动物抗体的干扰

HAAA有IgG、IgA、IgM和IgE属,可分为抗独特型和抗同种型,有多种动物IgO抗兔、抗山羊抗体作为免疫分析的第二抗体。由于不同动物Ig分子间蛋白质序列有大量同源性,因此多种动物Ig之间会发生交叉反应。

HAAA可由医源性和非医源性因素引起。前者是人体免疫系统对药用性蛋白的正常应答。动物身上可得到的药剂非常多,如:鼠McAb的靶向性药物或成像剂、马抗毒素和抗胸腺细胞Ig、羊抗地高辛Fab、嵌合抗体和胰岛素等。另外还有输血和接种疫苗等途径。它们的存在会对体外的免疫分析产生干扰,也会使治疗抗体失活和干扰小鼠McAb治疗和成像。

3、嗜异性抗体与HAAA的干扰

Prince等提出双位点免疫分析的干扰机制,更多的干扰现象被揭示,干扰机制也有了很多的假设。首先Id的干扰具有广泛性,HAAA的干扰呈现出上升趋势;其次与多克隆抗体(PcAb)一样,McAb的分析中也存在着干扰;许多干扰因素对一种分析方法有影响,而对另一种分析方法没有影响。

在双位点免疫分析中,血清中的HAMA能够非特异性桥联捕捉抗体和示踪抗体而导致假阳性,而假阴性是由于HAAA与捕捉抗体、示踪抗体其中之一结合,使它们不能与分析物结合。Id的干扰机制和HAMA类似。形成Fab-Fab结构。另外分析用抗体Fc片段也会和干扰抗体结合形成干扰物。Id和HAAA的干扰,在竞争性结合分析中很少报道,可能是由于抗原和抗体间的高亲和力,使得HAAA很难与抗原竞争,但当HAAA浓度很高时,也同样造成了干扰。

4、干扰物的鉴定

鉴定干扰物的方法:采用另一种系列的分析方法重新测量样品,医学教育`网搜集整理如果干扰物是由独特型抗体间的互补反应所引起的,那么不同的双位点分析方法得出的结果是大相径庭的。此外,阻断剂也可用于鉴定干扰物,通过添加阴断剂导致值的改变是“干扰物存在”的一个假设性证据。采用一系列浓度梯度的阻断剂,可以防止具有高浓度的Id或HAAA的患者超过试剂的阻断能力。临床实验室鉴定干扰物也可采用高浓度的动物混合血清做稀释试验,当稀释样品后,测出的值不成比例说明存在干扰物。

此外,HAMA试剂盒有:ImmuSTRIP HAMA、EFI-HAMA、HAMA-ELISA medac、HAMA RIA、Ideal HAMA ELISA及Enzygnost HAMA,它们不仅检测是否存在干物,又能起监测注射动物源性制剂引起的并发症。

本新闻共3页,当前在第1页  1  2  3  

我要投稿 新闻来源: 编辑: 作者:
相关新闻
2011年医学检验资格考试:酶标仪单、双波长技术分析
2011年医学检验资格考试:HBsAg定量检测及其临床意义
11年医学检验资格考试辅导:肿瘤标志物的组合及意义
11年医学检验资格考试辅导:肿瘤标志的研究历史
11年医学检验资格考试辅导:肿瘤标志物检验及评价