发病一周内取血液，第二周以后取尿，有脑膜炎型症状者取脑脊液进行检查。

　　1.显微镜检查 直接镜检： 取抗凝血1000转/分、离心10分钟，除去血细胞;血浆再以10000转/分，离心40分钟，弃上清取沉淀物暗视野显微镜检查。染色镜检：涂片后用Fontana镀银染色镜检。另外，还可用免疫荧光法或免疫酶染色法检查。

　　2.分离培养与鉴定 将血液数滴接种于柯氏(Korthoff)培养基(4.5～5ml)，每份标本接种2～3管，于30℃培养5天，每隔3～5天，用暗视野显微镜检查一次。如有钩体生长，再传代培养，用生长良好的菌液作鉴定，阴性者至少培养30～40天，仍未查到才能报告。尿液标本一般需浓缩(离心)后培养，培养时需加抑菌剂如5-氟尿嘧啶等;也可将标本接种于豚鼠腹腔进行分离。